1. Odabir prave ćelijske linije
Prilikom odabira odgovarajuće ćelijske linije za svoj eksperiment, uzmite u obzir sljedeće kriterije:
a.Vrste: Ćelijske linije koje nisu ljudi i primate obično imaju manje ograničenja u pogledu biološke sigurnosti, ali na kraju će vaš eksperiment odrediti da li ćete koristiti kulturu određene vrste.
b. Karakteristike: Koja je svrha vašeg eksperimenta?Na primjer, stanične linije izvedene iz jetre i bubrega mogu biti pogodnije za ispitivanje toksičnosti.
c. Ograničeno ili kontinuirano: Iako vam biranje između ograničene ćelijske linije može pružiti više opcija za izražavanje ispravne funkcije, kontinuirane ćelijske linije općenito je lakše klonirati i održavati.
d. Normalne ili transformisane: Transformisane ćelijske linije obično imaju veću stopu rasta i veću efikasnost zasijavanja, kontinuirane su i zahtevaju manje seruma u medijumu kulture, ali je njihov fenotip prošao trajne promene kroz genetsku transformaciju.
e. Uslovi i karakteristike rasta: Koji su vaši zahtevi za brzinu rasta, gustinu zasićenja, efikasnost kloniranja i sposobnost rasta u suspenziji?Na primjer, da biste eksprimirali rekombinantne proteine u visokim prinosima, možda ćete morati odabrati ćelijske linije koje imaju brze stope rasta i sposobnost rasta u suspenziji.
f.Drugi kriterijumi: Ako koristite ograničenu ćelijsku liniju, da li ima dovoljno raspoloživih zaliha?Da li je ćelijska linija potpuno okarakterizirana ili je morate sami provjeriti?Ako koristite abnormalnu ćelijsku liniju, postoji li ekvivalentna normalna ćelijska linija koja se može koristiti kao kontrola?Da li je ćelijska linija stabilna?Ako ne, koliko je lako klonirati ga i stvoriti dovoljno zamrznutih zaliha za vaš eksperiment?
2.Nabavite ćelijske linije
Možete izgraditi vlastitu kulturu od primarnih ćelija, ili možete odabrati da kupite uspostavljene ćelijske kulture od komercijalnih ili neprofitnih dobavljača (tj. banaka ćelija).Renomirani dobavljači pružaju visokokvalitetne ćelijske linije koje su pažljivo testirane na integritet i osiguravaju da kultura ne sadrži zagađivače.Preporučujemo da ne posuđujete kulture iz drugih laboratorija jer postoji veliki rizik od kontaminacije ćelijske kulture.Bez obzira na izvor, provjerite jesu li sve nove ćelijske linije testirane na kontaminaciju mikoplazmom prije nego počnete koristiti.
Vrijeme objave: Feb-01-2023